今儿有空，再写点。这次是愈伤组织再分化的问题

exwy · 发表于 2017-10-6 12:19

增殖手段一般两种，一种是诱导大量愈伤组织再分化，另一种是诱导愈伤组织再分化以后再利用丛芽增殖。这次先说愈伤组织再分化。不是所有的愈伤组织都是分化为完整个体，特别松散的或者白化的愈伤组织是无法分化的，必须低激素浓度继续增殖出可用的组织。一般可用的细胞团有两种，一种是直径大概3mm左右的独立的细胞团，是直接分化成丛芽的，一般是略高激素浓度诱导出的，部分可能呈现轻微玻璃化但是不会有白化或者黄化。另一种是很大个的愈伤组织块，个体丛组织块上长出这种组织块一般呈现白色非常非常皮实，绝对不会有玻璃化的情况，一般是略低激素情况下增殖出的。这两种愈伤组织没法说哪个好，但是我一般喜欢第二种。第一种虽然在愈伤组织阶段增殖快，但是在分化阶段需要消耗大量时间。而且愈伤组织太小分化出来的丛芽个头就太小，生长还需耗费很多时间。并且玻璃化的愈伤组织很多时候分化出来的个体还是玻璃化的。第一种一般3-6ba做出来，第二种一般2-6ba或者1-kt做出来。分化的时候分化出单独的叶子并不成完整个体的情况屡见不鲜，这是因为激素浓度高了，出现这种情况一般把开始分化的愈伤组织切半甚至切几瓣然后重新投入瓶中或者组织不做处理但是培养基换成低激素浓度的。
愈伤组织玻璃化，黄化，白化也是常见问题。主要的影响因素是激素浓度，添加物还有光照强度。激素是最主要因素，一般只要降低激素浓度，就不会出现这几种问题。培养基杀菌（抑菌）剂、化学诱变物质也有相当程度的影响。光照的影响相对较小，但还是有的，增强光照可以抑制这三种问题。
一般来说玻璃化，黄化白化的组织怎么处理呢？玻璃化的别管它，因为我发现玻璃化的组织分化以后增殖容易出錦，黄化的增强光照就可以慢慢恢复，再不行就换个稍微低激素的培养基。白化的组织我就直接拿出来扔掉，因为处理它麻烦，不值得处理了。
我不是学这个专业的，也没看太多这方面的书籍，玩组培时间也不长。这些都是我自己实验总结的，肯定不全面也肯定不是最好的，但是这都是经过实践考验的东西，绝对不会出现差错是可以保证的。

我要变白 · 发表于 2017-10-18 22:10

希望楼主多发一下自己实践的经验，给我们这样小玩家分享一下

碧溪花园 · 发表于 2017-10-16 20:58

诗羊诗羊发表于 2017-10-16 12:23
弱弱的问。啥叫空白培养基呀

就是培养基中不添加任何激素

诗羊诗羊 · 发表于 2017-10-16 12:23

碧溪花园发表于 2017-10-6 21:24
我一般空白培养基过渡一下，长的比较壮

弱弱的问。啥叫空白培养基呀

exwy · 发表于 2017-10-14 14:04

cx0820 发表于 2017-10-11 16:42
增殖过程要照灯吗?

晒太阳也没问题，没太阳就要灯

exwy · 发表于 2017-10-14 14:03

是物理的e 发表于 2017-10-14 12:58
想知道楼主是学什么专业的

双学位。都跟生物和化学不沾边

是物理的e · 发表于 2017-10-14 12:58

想知道楼主是学什么专业的

cx0820 · 发表于 2017-10-11 16:42

增殖过程要照灯吗?

好多肥肉 · 发表于 2017-10-11 15:34

学习

yjf · 发表于 2017-10-11 15:23

大师呀，求抱大腿

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今儿有空，再写点。这次是愈伤组织再分化的问题

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